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產品展示   Products原代細胞>>兔原代細胞>>兔原代椎間盤纖維環原代細胞
 
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產品名稱:
兔原代椎間盤纖維環原代細胞
產品型號:
產品報價:
2600
產品特點:
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  兔原代椎間盤纖維環原代細胞的詳細資料:

兔原代椎間盤纖維環原代細胞

商品屬性:

兔原代椎間盤纖維環原代細胞

規格

5x105cells/T25或1mL凍存管

貨號

EY-XY3882

種屬來源

組織來源

椎間盤

生長特性

貼壁生長

形態特征

多角形細胞,不規則

形態:多角形細胞,不規則
培養基:兔椎間盤纖維環細胞wan全培養基

培養環境:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

傳代特征:可傳5代左右;3代以內狀態

 


兔原代椎間盤纖維環原代細胞

細胞基本屬性:

兔原代椎間盤纖維環原代細胞

種屬來源

組織來源:椎間盤椎間盤

生長特性:貼壁生長

產品規格5x105cells/T251mL凍存管
換液頻率2-3天換液一次

消化液

產品貨期5-6周左右

運輸方式T25培養瓶/ 順豐快遞(包郵)

供應限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用

背景介紹:兔椎間盤纖維環細胞采用膠原酶-中性蛋bai酶聯合消化法并結合軟骨細胞專用培養基培養篩選制備而來,兔椎間盤纖維環細胞分離自椎間盤組織;椎間盤是位于脊柱兩椎體之間,由軟骨板、纖維環、髓核組成的一個密封體。上下有軟骨板,是透明軟骨復蓋于椎體上,下面骺環中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環一起將髓核密封起來。纖維環由膠原纖維束的纖維軟骨構成,位于髓核的四周。纖維環的纖維束相互斜行交叉重疊,使纖維環成為堅實的組織,能承受較大的彎曲和扭轉負荷。纖維環的前側及兩側較厚,而后側較薄。纖維環的前部有強大的前縱韌帶,后側的后縱韌帶較窄、較薄。纖維環細胞密度為9000個細胞/mm3,其外層的細胞呈梭型,主要屬于纖維細胞,內層細胞呈圓形,主要屬于軟骨細胞。在培養的情況下,用透射電鏡觀察則有許多共同的超微結構表現,它們的核較圓,核仁較明顯。細胞質內可見大量的附有核糖體顆粒的粗面內質網和滑面內質網。細胞質內線粒體多,為橢圓形,有的可看到雙層單位膜,由單位膜包繞初級深酶體和次級深酶體。細胞質內有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復合體和分泌顆粒,纖維環細胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛,保證纖維環生理代謝活動所需的構造物質的供給。一但這種供給減少,纖維環的生物性能就會減弱,椎間盤開始退變。

 


兔原代椎間盤纖維環原代細胞

原代細胞培養的主要步驟包括:

兔原代椎間盤纖維環原代細胞
?一、剝離組織,去除外膜、結締組織等?:將組織從動物體中取出,并去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。

二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?:使用生理鹽水或其他適當的緩沖液洗滌組織,然后將其剪成約1mm大小的小塊。

三、?用0.1%~0.2%的消化?:將剪碎的組織塊加入含有0.1%~0.2%的緩沖液中,進行消化。消化時間可根據具體實驗需求選擇熱消化(37℃)或冷消化(4℃),熱消化時間短,冷消化時間長但條件更溫和。

?四、吹打分散后,過濾、計數?:將消化后的細胞吹打到一個離心管中,然后過濾、計數。

五、?按30萬/毫升分瓶培養?:將計數后的細胞按30萬/毫升的濃度分瓶培養。

細胞培養操作:

兔原代椎間盤纖維環原代細胞
收貨處理取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態

傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養

傳代代數可傳5代左右;3代以內狀態

傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿

傳代方法:

1.吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養基終止消化;

3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;

4.待細胞貼壁后,培養觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養基。

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