商品詳情:
骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是骨髓基質(zhì)干細(xì)胞,對骨髓中的造血干細(xì)胞(HSC)不僅有機(jī)械支持作用,還能分泌多種生長因子(如IL-6,IL-11,LIF,M-CSF及SCF等)來支持造血。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)具有多向分化潛能,能促進(jìn)間充質(zhì)組織的再生,如:骨、軟骨、肌肉、韌帶、肌腱、脂肪及基質(zhì)等組織。在骨髓中,BMSCs占骨髓有核細(xì)胞總數(shù)的0.001%~0.1%,含量極低。而同時(shí),由于組織工程需要大量的種子細(xì)胞,從嚙齒類動物骨髓分離BMSCs的技術(shù)上的難度限制了許多實(shí)驗(yàn)的開展。體外分離培養(yǎng)純度高、活力強(qiáng)、生物特性均一的BMSCs對組織工程及細(xì)胞的體內(nèi)、體外實(shí)驗(yàn)顯得至關(guān)重要。
1) 組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的正常骨髓血組織。
2) 細(xì)胞鑒定:CD44免疫熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
5) 細(xì)胞生長方式:長梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。

商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞永生化 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
貨號 | E-XB6690 | 種屬 | 小鼠 |
生長特性 | 貼壁培養(yǎng) | 細(xì)胞形態(tài) | 長梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞, |
細(xì)胞系培養(yǎng)步驟:
細(xì)胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞傳代和細(xì)胞凍存。
細(xì)胞復(fù)蘇?:
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進(jìn)其融化。
將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37℃預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代?:
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DME培養(yǎng)基終止消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
?細(xì)胞凍存?:
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
這些步驟確保了細(xì)胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴(kuò)展,為科學(xué)研究提供了大量的細(xì)胞樣本?。
?細(xì)胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞傳代和細(xì)胞凍存。
細(xì)胞復(fù)蘇?:
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進(jìn)其融化。
將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37℃預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代?:
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM培養(yǎng)基終止消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞凍存?:
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
這些步驟確保了細(xì)胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴(kuò)展,為科學(xué)研究提供了大量的細(xì)胞樣本?
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細(xì)胞接收后的處理:
1)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞永生化收到細(xì)胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。